腺关联病毒属于微微恙毒科(parvovirus)，为无包膜的单链线状DNA病毒twitter 巨臀，基因组大小约4.7kb。讹诈腺关联病毒不错将外源基因转入动物组织和细胞中，具有安全性高、免疫原性低、宿主领域广、抒发相识等多种优点，无为应用于动物体内盘问。
腺关联病毒血清型繁多（12种），不同血清型对不同组织亲和性不同，因此在具体科学盘问中，以下问题往往困扰着纷乱科研职责者：聘请何种血清型？奈何打针？打针几许病毒？打针部位奈何聘请？打针多久检测？本文就常见的打针部位（大脑、视网膜、肝脏、腹黑和动脉、肺脏、肾脏、肌肉、肠）和重要作念一个浮浅的归纳，但愿大约为全国提供一个观念和念念路。一、大脑大脑组织常用血清型有 AAV1，AAV2，AAV5，AAV8 和 AAV9，其中神经组织常见的血清型有 AAV2，AAV5 和 AAV8.对大脑组织而言，AAV5 应用领域更广，AAV8 更有用（值得小心的是，在山公的神经组织中，AAV5 更有用）。从作用后果上看，AAV8 大于 AAV1.针对大脑组织不同部位，AAV 不同血清型靶向性有所互异：1）海马组织：AAV9 比 AAV8 更有用；2）神经组织不同的细胞，不同血清型靶向性不同：如神经元常用的血清型有 AAV1、AAV2、AAV5 和 AAV9;星形胶质细胞和少突胶质细胞常用的血清型有 AAV1 和 AAV5.总体而言，在统共组织中，AAV2 适用性最广并在脑部组织也有所体现，举例其不错达到大脑组织75% 的区域。AAV2、AAV5、AAV8 和 AAV9也比较常见，应把柄不同组织进一步把稳聘请，在此先容几种特例：1、肠神经系统（Enteric Nervous System ENS），是由神经细胞构成的复杂收集，遍布通盘肠胃消化管谈。其神经元的数目和脊髓相配（约1亿个神经细胞）。该神经系统在东谈主体躯干下部，属于迷跑神经，以薄层的体式漫步于消化肌之间，转换消化。常用 AAV5、AAV6、AAV8 和 AAV9.AAV6 对肠神经胶质和神经元有一定的靶向性。打针部位不错聘请降结肠，打针量和滴度： 滴度为 1.3 × 1012 GC/ml的病毒打针 5 μl 即可，检测手艺：打针后 2 周开动抒发，2-6周均有检测。
2、脑组织常见的血清型为 AAV9，打针重要：左心室打针或者侧脑室打针，打针剂量和滴度：聘请滴度为 0.5–4.0 × 1011 GC/ml 的病毒液，稀释成 100 μl ，打针两周之后（14d）开动检测。
二、视网膜视网膜组织常用血清型有 AAV1、AAV2 和 AAV5.视网膜组织由于其阑珊性，因而有本身的特色：打针得手率 20-30%，容易形成视网膜炎症和损害，打针完需要使用 1% 阿托品（和极少新霉素、多粘菌素B硫酸盐和地塞米松眼膏施用于眼睛，延迟瞳孔扩展手艺，减少腺体分泌，减少炎症反映），相接使用 3-5 d.其常用的打针量为 0.5 μl ，病毒滴度 1.5x107 GC/ml.常用打针重要：视网膜下打针或者玻璃体打针。但不同血清型又有不同特色：AAV1 主要作用于视网膜上皮细胞，打针后 2-4 周不错检测；AAV2 主要作用于感光细胞、视网膜上皮细胞和玻璃体，AAV2 玻璃体打针后漫步无为，2-4 周不错检测； AAV5 可作用于视网膜上皮细胞和感光细胞，在感光细胞中抒发 AA5>AAV2，2-4 周检测。下图为一些视网膜组织的打针情况
三、肝脏
对肝脏而言，主要的腺关联病毒载体有：AAV2、AAV5、AAV7 和 AAV8，其中 AAV7 和 AAV8 的效用是 AAV2 的 10-100 倍。打针部位常聘请门静脉、外周静脉和尾静脉。打针病毒滴度一般聘请 8×1010-2×1012（GC/kg）（东谈主、灵长类）；1×1011 GC/只鼠，稀释成 50-100 μl 进行尾静脉打针；打针后 2 周之后不错检测。
四、腹黑和动脉对腹黑和动脉而言，常用载体有：AAV1、AAV6、AAV8 和 AAV9.其中 AAV2、AAV5、AAV7 也不错使用，然而抒发比较慢，3 个月后抒发量智力与 AAV1、AAV6 抒发量相配。
统共血清型中 AAV8 和 AAV9 最有用，2 个月独揽其抒发量达到最高。常见的打针部位为冠状动脉、主动脉、心肌和尾静脉。打针病毒滴度为 1.9×1011-1012 GC/ml，稀释成 100μl-250μl（大鼠剂量稍高于小鼠）打针；然而关于腹黑原点打针而言，常摄取 1010 GC/ml 病毒滴度，稀释成 20 μl 使用。检测手艺：一般在 2 周之后不错检测。
五、肺脏肺脏常用的腺关联病毒载体有 AAV1、AAV2、AAV5、AAV6 和 AAV9.由于肺脏名义唾液酸受体漫步比较多，因此 AAV5 型比较常用；比较之下 AAV2 和 AAV6 转导效用相配。常见的打针神气有滴鼻、雾化吸入或气管内打针，打针病毒滴度为 1012 GC/ml ，稀释成 3 μl，打针完之后 2 周不错检测抒发情况
六、肾脏
肾脏常用载体有 AAV2、AAV8 和 AAV9.打针病毒的滴度一般聘请 1-5×1011 GC/ml，稀释成 50-200 μl 打针。常见的打针部位有肾动脉、肾静脉和左髂脉、腹主动脉，打针完 2 周之后不错检测抒发情况。下图为打针的一些情况：
七、肌肉肌肉组织常用血清型有 AAV2、AAV8 和 AAV9.其中 AAV8、AAV9 最常用，心肌、胰腺和肾上腺亦然如斯。骨骼肌分为快速和慢速肌纤维，AAV2 常作用于慢速肌纤维；AAV6 则对二者王人有用。对不同庚岁阶段的鼠，打针剂量有所不同：幼鼠聘请的病毒量为 7×1010 -1.2×1011 GC/g;成年鼠聘请的病毒量为 3.5 ×1011 -7×1012 GC/只；然而低剂量的 AAV9 不可到达统共心肌细胞。下图为打针的一些情况：
李蓉蓉 麻豆八、肠肠组织常用血清型有AAV1、AAV2 和 AAV5.常见的打针神气有口服、灌肠、腹腔打针、肠系膜动脉打针。一般聘请打针滴度1×1011 GC/ml， 稀释成 100 μl（PBS 或者稀释液稀释）使用，打针 2 周后不错检测。参考文件：1.Weinberg， M.S.， R.J. Samulski， and T.J. McCown， Adeno-associated virus （AAV） gene therapy for neurological disease. Neuropharmacology， 2013. 69: p. 82-8.2.Iwata， N.， et al.， Global brain delivery of neprilysin gene by intravascular administration of AAV vector in mice. Sci Rep， 2013. 3: p. 1472.3.Pang， J.J.， et al.， Comparative analysis of in vivo and in vitro AAV vector transduction in the neonatal mouse retina: effects of serotype and site of administration. Vision Res， 2008. 48（3）： p. 377-85.4.Lisowski， L.， et al.， Selection and evaluation of clinically relevant AAV variants in a xenograft liver model. Nature， 2014. 506（7488）： p. 382-6.5.Wang， L.， et al.， Sustained expression of therapeutic level of factor IX in hemophilia B dogs by AAV-mediated gene therapy in liver. Mol Ther， 2000. 1（2）： p. 154-8.6.Nathwani， A.C.， et al.， Safe and efficient transduction of the liver after peripheral vein infusion of self-complementary AAV vector results in stable therapeutic expression of human FIX in nonhuman primates. Blood， 2007. 109（4）： p. 1414-21.7.Manno， C.S.， et al.， Successful transduction of liver in hemophilia by AAV-Factor IX and limitations imposed by the host immune response. Nat Med， 2006. 12（3）： p. 342-7.8.Palomeque， J.， et al.， Efficiency of eight different AAV serotypes in transducing rat myocardium in vivo. Gene therapy， 2007. 14（13）： p. 989-997.9.Vassalli， G.， et al.， Adeno-associated virus （AAV） vectors achieve prolonged transgene expression in mouse myocardium and arteries in vivo: a comparative study with adenovirus vectors. International Journal of Cardiology， 2003. 90（2-3）： p. 229-238.10.Bish， L.T.， et al.， Adeno-associated virus （AAV） serotype 9 provides global cardiac gene transfer superior to AAV1， AAV6， AAV7， and AAV8 in the mouse and rat. Human gene therapy， 2008. 19（12）： p. 1359-1368.11.Halbert， C.L.， et al.， Repeat transduction in the mouse lung by using adeno-associated virus vectors with different serotypes. Journal of virology， 2000. 74（3）： p. 1524-1532.12.Takeda， S.， et al.， Successful gene transfer using adeno-associated virus vectors into the kidney: comparison among adeno-associated virus serotype 1-5 vectors in vitro and in vivo. Nephron Exp Nephrol， 2004. 96（4）： p. e119-26.13.Qi， Y.F.， et al.， Comparison of the transduction efficiency of tyrosine-mutant adeno-associated virus serotype vectors in kidney. Clin Exp Pharmacol Physiol， 2013. 40（1）： p. 53-5.14.The potent dial of adeno-assoc iated viral vectors for gene delivery to muscle tissue. Expert Opin Drug Deliv.， 2014. 11（3）。15.Z Wang1， H.-I.M.， 3， J Li1， L Sun1， J Zhang1 and X Xiao1，2， Rapid and highly efficient transduction by doublestranded adeno-associated virus vectors in vitro and in vivo. Gene Therapy， 2003. 2003（10）： p. 2105—2111.16.Polyak， Steven， et al. “Gene delivery to intestinal epithelial cells in vitro and in vivo with recombinant adeno-associated virus types 1， 2 and 5.” Digestive diseases and sciences 53.5 （2008）： 1261-1270.17.Polyak， S.， et al.， Gene delivery to intestinal epithelial cells in vitro and in vivo with recombinant adeno-associated virus types 1， 2 and 5. Digestive diseases and sciences， 2008. 53（5）： p. 1261-1270.